毕竟小鼠有可能会抓挠，因而针对小鼠的VNS中，电极直接接触神经干、以确保刺激效率。

　　最后，通过双光子实时成像采集eGFP强度。

　　而量化指标，胆碱能神经元激活率看eGFP和区域荧光强度变化；黏液分泌看tdTomato与囊泡出胞速率……

　　最终，得出结论：VNS组，刺激后十分钟，肠神经丛eGFP强度暴涨三倍，意味着胆碱能神经元被VNS手术激活。

　　同时，杯状细胞tdTomato信号爆发，黏液分泌速率提升四倍！

　　而相比之下，假手术组，则没有这些变化。

　　阿托品组由于有拮抗剂的存在，上述效应完全被阻断。

　　至此，足以证明VNS通过胆碱能通路促粘液分泌！

　　“接着就是VNS驱动阿克曼菌特异性定植了……”

　　此时，众人的心里更加紧张。

　　这是重中之重。

　　也是决定一切的关键！

　　如果能证明VNS可以增加阿克曼菌，这次的实验，就成功了一大半！

　　相反，若是得到相反的结果，恐怕之前的所有猜想都没有意义了。

　　“这次用的是什么小鼠？”

　　众人看向许秋。

　　许秋给出了介绍：“人源化菌群小鼠。

　　“具体来说，是无菌C57B-L/6小鼠灌胃健康人粪便菌液，其中含0.001%阿克曼菌。”

　　这等于是为此次试验量身定做的小鼠。

　　若非这里是协和，各种实验动物模型都能找到，可能仅仅是培育，就要数周的时间！

　　这也就是大平台的优势了。

　　换做是在临医，恐怕根本没法提供所需的各种实验动物！

　　许秋即便想要验证，可能也要当场自己选育、培养对应的小鼠，等真正做实验的时候可能已经是数个月之后的事情了。

　　而除开实验动物，此次所用的菌群追踪技术也尤为关键。

　　许秋在考察了协和研究所这边拥有的设备后，最终选定了FISH时空定位。

　　探针，选取的是Akk-405。

　　阿克曼菌-16S-rRNA-Cy5标记探针。

　　黏液层定位，则是WGA-Alexa488标记黏蛋白。

　　相比之下，成像方案就非常简单粗暴了。

　　直接麻醉下、经钢门插入共聚焦纤维内镜，动态拍摄回肠末端，直接观察菌群。

　　“这套方案也堪称完美了。”

　　此时，了解到许秋的具体实验规划后，莫雷蒂等人都啧啧称奇。

　　实验室普遍的手法，是16S测序。

　　但，16S测序缺点不少。

　　它只能反映菌群总量变化、无法区分活菌死菌，而且采样的过程中难免会破坏肠道结构。

　　这种破坏，对于讲究严格对照实验的科研项目来说，是很严重的不确定性因素。

　　而许秋选用的FISH活体成像，却避开了这三个缺点，甚至将其转化为了优点。

　　首先，它可以实时观测菌-黏液空间的关系，不再机械式地只能查看菌群总量，而是能综合分析！

　　此外由于有rRNA探针的存在，它能做到知检测活菌，这也是它被称为“FISH活体成像”的关键！

　　最后一点，则是能够无创动态追踪同一部位，可以完美地查看任何区域在任何时候的所有变化！

　　而在这堪称完美的实验设计之下，结果很快出炉。

　　最终发现——VNS组，红色的阿克曼菌迅速聚集在绿色的黏液层深部。

　　菌密度达到了足足八倍！

　　而假手术组，也即对照组，细菌却依旧随机分散于肠腔，没有出现任何菌群的富集现象。

　　这让众人感到无比振奋！

　　“在VNS的作用下，阿克曼菌真的聚集在一块了！”

　　“而且短短十几分钟内，菌群密度就已经达到了八倍，若是一个小时、十个小时，恐怕八十倍、八百倍都问题不大！”

　　菌群的繁殖与生长，呈现指数级生长。

　　一个变两个，两个变四个……越到后面，数量越爆炸，差距也越大。

　　当然，真实的人体环境中，不可能存在无限制的暴涨。

　　彭月娇体内的一千倍，或许就已经是她的肠道环境所能容纳的极限了。

　　总之，眼下的实验已然证明，VNS确实能够特异性地增加阿克曼菌！

　　“还有最后一点！”

　　此时，众人都亢奋起来。

　　这一步，就需要用到基因编辑动物了。

　　其一-->>

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